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聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)是分子生物學(xué)中基礎(chǔ)且廣泛應(yīng)用的技術(shù)之一,用于特異性擴增目標(biāo)DNA片段。盡管PCR儀和試劑是核心要素,但實驗的順利進行同樣高度依賴一系列專用耗材。這些pcr耗材不僅影響反應(yīng)效率和特異性,還直接關(guān)系到實驗的重復(fù)性...
BiteSizeBio列出了“清理DNA樣本的5種方法”。在某種程度上,這個總結(jié)是過時的并且具有誤導(dǎo)性。讓我們來看看它們是如何工作的。苯酚-氯仿萃取以去除蛋白質(zhì)。將DNA溶液與苯酚和氯仿混合。水溶性DNA分配到水相中,而蛋白質(zhì)在有機溶劑存在下變性,從而留在有機相中。乙醇沉淀脫鹽。在DNA提取中,鹽通過破壞將核酸固定在一起的蛋白質(zhì)鏈來釋放DNA鏈。由于DNA不溶于乙醇。在乙醇溶液中,鹽使DNA不易溶于水,同時有助于保持蛋白質(zhì)(有機小分子)溶解在水中。結(jié)果是,DNA分子聚集并從溶...
DNA凈化,也稱為磁珠凈化,是指從樣品混合物中定向去除小DNA片段,例如引物、接頭和二聚體,用于下游PCR、DNA連接/克隆或DNA文庫等。有時,有些人所說的DNA凈化可能指的是去除DNA提取過程中實際涉及的其他物質(zhì),例如鹽、蛋白質(zhì)和酶等。我們可以稱之為預(yù)清理。因此,現(xiàn)在通過DNA凈化,我們特別關(guān)注引物、接頭以及由引物或接頭形成的二聚體,因為它們也是由DNA寡核苷酸形成的。也就是說它們也是DNA片段。當(dāng)這些碎片在樣品中以高比例存在時。它們可能會導(dǎo)致各種問題并干擾NGS儀器上的...
氯膦酸鹽脂質(zhì)體:由同心磷脂雙層組成的人造球體,包裹著含有氯膦酸鹽的PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)水溶液。脂質(zhì)體是顆粒,尺寸最大。3微米。它們在PBS中形成懸浮液,并在儲存時傾向于沉淀,在管或燒瓶底部形成沉淀。在給予實驗動物之前應(yīng)搖動懸浮液,以恢復(fù)均勻的懸浮液。懸浮液中氯膦酸鹽的濃度約為。5毫克/毫升。AshavanRooijen于2013年創(chuàng)立了LIPOSOMA,旨在將免疫學(xué)研究工具氯膦酸鹽脂質(zhì)體推向市場。氯膦酸鹽脂質(zhì)體由NicovanRooijen開發(fā),在全球范圍內(nèi)用于研究各種自...
金納米顆粒綴合物已廣泛應(yīng)用于生物研究和生物傳感應(yīng)用。例如,金納米顆??梢杂米鞴鈱W(xué)或電子顯微鏡、側(cè)流免疫測定和免疫印跡方案(例如斑點印跡和蛋白質(zhì)印跡)中的探針。制備金綴合物有兩種方法,即被動吸附和通過連接體的共價偶聯(lián)。盡管制備過程相對簡單,但蛋白質(zhì)對金納米顆粒的被動吸附并不能提供涂層的附著,因為隨著時間的推移,分子可能會從表面解吸。此外,在某些情況下,蛋白質(zhì)在吸附到表面后會失去其特性,這可能是由于三級結(jié)構(gòu)的變化或活性位點/抗原結(jié)合位點與金表面的結(jié)合使其難以接近而引起的。盡管存在...
磁性葡聚糖納米顆粒(nanomag®-D)直徑有130nm、250nm和500nm,可以在永磁體上分離,采用核殼法以磁鐵礦核和葡聚糖殼制造,由右旋糖酐(40,000Da)基質(zhì)中的75-80%(w/w)磁鐵礦組成,具有表面基團OH(普通)、NH2、PEG-NH2和COOH或PEG-COOH,用于蛋白質(zhì)、抗體和其他分子的共價結(jié)合,可與共價結(jié)合的蛋白質(zhì)(抗生物素蛋白、鏈霉抗生物素蛋白、蛋白質(zhì)A)或其他生物分子(生物素)結(jié)合使用,可以根據(jù)要求用共價結(jié)合的抗體生產(chǎn),與鎳(II)...
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