Fluorescein PEG aldehyde，產(chǎn)品型號(hào)：PG2-ALFC-5k   Specification5000 Da

熒光素聚乙二醇醛，F(xiàn)ITC-聚乙二醇-CHO

Fluorescein PEG Aldehyde, FITC-PEG-CHO

熒光素PEG醛(FITC-PEG-CHO)是Nanocs的反應(yīng)性熒光PEG染料之一，可以與N-末端胺反應(yīng)。熒光素是一種亮綠色熒光染料，其激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為495納米/515納米。醛基在pH 5-9范圍內(nèi)對(duì)胺、酰肼或氧胺基團(tuán)具有反應(yīng)性。與胺反應(yīng)性琥珀酰亞胺酯基團(tuán)(NHS)不同，醛可以在酸性pH下與N-末端胺基團(tuán)反應(yīng)，這是某些生物偶聯(lián)反應(yīng)有時(shí)需要的條件。醛與胺基反應(yīng)形成中間體席夫鍵。用氫化物進(jìn)一步還原將形成穩(wěn)定的C-N鍵。醛和其他基團(tuán)之間的反應(yīng)允許熒光染料與目標(biāo)分子上的期望位置進(jìn)行位點(diǎn)特異性結(jié)合和標(biāo)記。在FITC通道下，共軛FITC染料很容易被普通的熒光儀器檢測(cè)到。FITC和醛之間的PEG接頭提供了更高的水溶性、更小的空間位阻和增強(qiáng)的穩(wěn)定性。與其他常用的熒光染料相比，Nanocs聚乙二醇化熒光染料更穩(wěn)定，更易于使用。

Fluorescein PEG Aldehde (FITC-PEG-CHO) is one of Nanocs' reactive fluorescent PEG dyes that can react with N-terminal amines. Fluorescein is a bright green fluorescent dye with excitation/emission wavelength at 495 nm/515 nm. Aldehyde group is reactive toward amines, hydrazide or oxyamine groups from pH 5-9. Unlike amine reactive succinimidyl ester group (NHS), aldehyde can react with N-terminal amine groups at acidic pH, a condition sometimes required for certain bioconjugation reactions. Aldehyde reacts with amine group to form an intermediate Schiff bond. Further reduction with hydride will form a stable C-N bond. Reaction between aldhyde and other groups allows site-specific conjugation and labeling of fuorescein dyes to desired position on targeted molecules. Conjugated FITC dye can be easily detected by common fluorescent instruments under FITC channel. PEG linker between FITC and aldehyde offers higher water solubility, less steric hindrance and enhanced stability. Compared to other commonly used fluorescent dyes, Nanocs pegylated fluorescent dyes are more stable and easier to use.

物理屬性:

• 外觀:橙色/黃色固體；
• 溶解性:溶于水、DMSO、DMF
• 反應(yīng)基團(tuán):醛(-CHO)；
• 反應(yīng)對(duì)象:N-末端胺、伯胺、氨基氧基、酰肼等。；
• Ex/Em波長(zhǎng):495nm/515nm；

儲(chǔ)存條件:

• 儲(chǔ)存在-20

  .避光。

反應(yīng)程序:

通常，熒光素PEG醛相對(duì)于含胺分子(如蛋白質(zhì)或抗體)的量過(guò)量5至10倍摩爾會(huì)導(dǎo)致足夠的綴合。

所需材料:

• 聚乙二醇化緩沖液:不含胺的水性緩沖液，pH 5.0~6.5。
• FITC聚乙二醇醛儲(chǔ)備液:1毫升結(jié)合緩沖液中含5-10毫克。
• 洗滌液:蒸餾水或任何含水緩沖液。

反應(yīng)步驟:

將目標(biāo)分子溶解在聚乙二醇化緩沖液中。估計(jì)目標(biāo)材料上伯胺基團(tuán)的濃度。向目標(biāo)結(jié)合材料中加入FITC PEG醛儲(chǔ)備液，終濃度保持至少10 mg/mL。讓混合物在室溫下攪拌2~4小時(shí)或過(guò)夜40C.反應(yīng)后，C=N鍵可以被*氫化鈉還原。綴合物可以通過(guò)尺寸排阻色譜法或透析來(lái)純化。

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