一、什么是質譜儀？

質譜儀是一種奇特的秤。當然，它比常規(guī)實驗室秤精確得多，但它具有相同的目的。當您將某些東西放入質譜中時，您最終會得到一個質量列表及其數(shù)量指示。

    MS 分析示例。機器記錄樣品中分子的質量/電荷 (m/z) 比。在此圖像中，您可以看到主要離子的 am/z 比為 528.8371。值得注意的是，該機器非常靈敏，您可以看到分子的同位素分布。

在現(xiàn)代質譜儀中，分子將依次遇到三個主要組件：離子源、質量分析儀、檢測器。

  1.離子源 – 離子源有多種類型，但我們不會在這篇博文中深入討論，敬請關注。為了基本理解機器，您需要記住的一件事是，這是分子將被電離（或獲得電荷）的地方。

  2.質量分析儀——同樣，質量分析儀有多種，但它們的目的是相同的：使用電流根據(jù)分子的質量過濾和分離分子。

  3.檢測器 – 檢測器是質譜儀的最后一個組件。它的作用是檢測電離分子產生的電流，并使用不同的策略將其轉化為質量。

二、什么是串聯(lián)質譜法？

您可能也已經看到，術語“串聯(lián)質譜法"或 MS/MS 是指研究目標分子片段而不是分子本身的質譜技術。進行 MS/MS 實驗時，我們使用質譜儀中的能量來分解我們想要研究的分子。結果是許多較小的分子片段，我們可以量化或使用它們來識別母體分子。  

串聯(lián)質譜通常用于減少獲得污染目標分子信號的干擾化合物的機會！

這背后的理論是，兩個具有相同質量和相同碎片的分子的機會比兩個具有相同質量的分子的機會要小。

三、質譜儀可以做什么？

通過適當?shù)馁|譜，您可以識別和/或量化幾乎任何可電離的物質。例如，如前所述，您可以獲得非常精確的分子定量，甚至達到每毫升亞皮克的水平。通過稱為SWATH的無標記LC-MS/MS的方法，還可以對數(shù)千種蛋白質進行相對定量 ，每個樣品只需進樣 3 次?；蛘?，您可以獲得化合物的精確質量，用于質量控制或研究目的。

四、如何使用質譜法？

進行質譜分析的方法有很多不同。您會看到，不同的質譜技術需要不同的樣品制備方案和注意事項。此外，即使我們堅持使用一種質譜技術（例如 LC-MS/MS），也可以通過多種方法來查看樣品。例如，如果您只想觀察少數(shù)分子并獲得非常精確的定量，則必須從包含它們的基質中提取感興趣的分子，清潔它們，將它們送入分離柱，使用 MRM 等定向采集方法對其進行分析并獲得數(shù)據(jù)報告。然而，如果您想要從細胞提取物中鑒定數(shù)千種蛋白質，那么制備物、LC、并且 MS/MS 方法可能會有所不同。但如果我必須描述我們通常如何確定如何使用 MS，它會是這樣的：

 1.確定您想要通過 MS 查看的內容。蛋白質？代謝物？脂質？其他？

 2.確定適合您需求的質譜技術或咨詢專家

 3.使用適當?shù)姆桨笍幕|中提取并純化分子

 4.在質譜儀上建立良好的采集方法

 5.執(zhí)行采集和數(shù)據(jù)分析

 6.生成清晰的數(shù)據(jù)報告

五、何時或為何使用質譜？

當您的實驗需要精度和/或分辨率時，您可以使用質譜法。此外，對于某些應用，您不必依賴試劑盒或抗體的可用性來進行研究。

六、GC-MS、LC-MS和CE-MS之間有什么區(qū)別？

MS 前面的 GC、LC 和 CE 是指分析物進入質譜之前的不同分離方法。在這些情況下，GC 代表氣相色譜法，LC 代表液相色譜法，CE 代表毛細管電泳。

七、質譜法是定量的嗎？

是的，MS 可以是定量的。為此，操作員將選擇一種可以量化您感興趣的分子的采集方法。值得注意的是，這種量化可以是絕對的，也可以是相對的。

八、質譜準確嗎？

準確。同樣，這取決于負責分析的團隊的技能，但總的來說，MS 是可用的最準確的檢測/定量方法之一。它還可能取決于您使用的儀器。打個簡單的比方，如果您在 90 年代的電視或全新的 OLED 4K UHD 電視上觀看您喜愛的電影，您將不會獲得相同的圖像質量。這同樣適用于質譜儀。如果您使用低分辨率質譜儀，您可能會得到比全新高分辨率儀器更模糊的結果。

九、質譜儀有多靈敏？

取決于您感興趣的分子及其所在的基質。

對于定量方法，服務提供商通常會建立感興趣分子的線性檢測范圍，并嘗試將測試樣品納入范圍內。

為此，我們可以按原樣使用樣品，或者濃縮/稀釋樣品以使其進入線性范圍。因此，對于質譜儀來說，濃度太高或太低的物質并不多。

十、質譜法貴嗎？

它可能看起來像，但事實并非如此?？紤]到您可以從質譜分析中擠出的一切，它可能是比經典分子生物學技術更好的投資。MS 本身除了給出樣品中某種物質的質量和含量外，并不能做更多的事情。然而，當你將它與其他技術結合起來時，它可能會物有所值。

例如，在一次注射中，MS 可以提供有關您感興趣的蛋白質的每個相互作用伙伴的定量信息，或者通過提供幾種代謝物的定量來提供藥物代謝的定量信息。因此，在一次實驗中，您可能可以將獲得的結果數(shù)量增加很多。